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曲霉屬通用PCR試劑盒所用試劑的配制方法分享
點擊次數:22 發布時間:2022-02-15
  曲霉屬通用PCR試劑盒適用于反應后去除引物、酶、礦物油、甘油、鹽等雜質;也同樣適用于酶切、連接、磷酸化、補平或切平、隨機引物等反應后的DNA純化,純化所得DNA可直接用于酶切、連接、轉化細菌、測序、PCR、雜交等后續操作。
  曲霉屬通用PCR試劑盒采用獨特的酶系統,樣品無需裂解,無需DNA提取和純化,可以直接進行PCR反應,適用于大規模樣品的高通量PCR篩選,也適用于其他如基因分型,轉基因的篩選,基因敲除分析和測序等應用,無需DNA提取與純化過程,樣品直接進行PCR,能夠耐受未純化樣本中存在的多種PCR抑制劑,每次使用前請輕輕搖勻后使用。PCR產物中含有的納米材料一般不影響電泳等后續操作。
  下面要為大家介紹的是曲霉屬通用PCR試劑盒所用試劑的配制方法:
  1、標準品
 ?。?)從試劑盒中取出一支標準品,于6000-10000rpm離心30秒。用1ml樣本稀釋液溶解,并用吸頭對準凍存管底部反復吸打5次以助溶解,充分混勻得到標準品S7,放置備用。
 ?。?)取7個1.5ml離心管(S0-S6)依次排列,各加入250μl樣本稀釋液。吸取250μl標準品S7到*個離心管中(S6),輕輕吹打混勻。從S6中吸取250μl到第二個EP管中(S5),輕輕吹打混勻。以此類推進行標準品的倍比稀釋。S0為樣本稀釋液。
  2、洗液工作液濃洗滌液按1:25倍用去離子水進行稀釋。例如用量筒量取240ml去離子水,倒入燒杯或其他潔凈容器中,再量取10ml濃洗滌液,均勻加入,攪拌混勻,在臨用前配妥。濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
  3、生物素標記抗體工作液生物素標記抗體液按1:100倍用生物素標記抗體稀釋液進行稀釋。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液,輕輕混勻,在臨用qian10分鐘內配妥。
  4、辣根過氧化物酶標記親和素工作液辣根過氧化物酶標記親和素按1:100倍用辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液進行稀釋。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液,輕輕混勻,在使用前十分鐘內配妥。
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