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曲霉屬通用PCR試劑盒的樣本處理方法分享
點擊次數:29 發布時間:2022-02-23
  曲霉屬通用PCR試劑盒利用DNA擴增的線性原理,可以測定樣品中已知序列的絕對或相對量。qPCR會監測每個PCR循環中的DNA擴增。當DNA處于對數線性擴增階段時,熒光量相對于背景增加。熒光積累至可測的那一點稱為閾值循環(CT)或交叉點。通過使用已知量的標準DNA的多次稀釋,可以產生對比CT的對數濃度的標準曲線。
  今天小編要與大家分享的是曲霉屬通用PCR試劑盒的樣本處理方法:
  1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
  2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
  3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
  4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
  5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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