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通過以下方法可以有效降低染料法PCR試劑盒的誤差
點擊次數:91 發布時間:2022-01-24
  染料法PCR試劑盒是指以酶作為標記物、以抗原和抗體之間免疫結合反應為基礎的固相吸附測定方法。因此,一個測定試劑,其有機組成部分包括:包被的抗原或抗體的固相支持物,即聚苯乙烯塑料微孔或試管;酶標記的抗體或抗原和酶的反應底物等。
  通過以下方法可以有效降低染料法PCR試劑盒的誤差:
  1、注意試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。
  2、仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書要求進行規范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,反復試驗確定成立后才能改進。
  3、檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有一定總結和分析問題的能力,對實驗中出現的意外情況能及時妥善解決。
  4、使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
  5、洗滌徹底,如若洗板不徹底,酶結合物本底顯色會呈現假陽性。洗滌液要新鮮,現用現配,陳舊的洗滌液會出現本底增高現象,也可能出現假陽性。
  6、評估試劑的實用性,試劑的穩定與否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。
  7、嚴控反應時間,反應時間過長,酶失活;反應時間過短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
  8、嚴格掌握顯色時間,顯色時間過短,加入終止液反應終止后,底物結合物的量過少,易出現假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應判為假陽性,這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結果。
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